中国组织工程研究 ›› 2012, Vol. 16 ›› Issue (50): 9370-9375.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2012.50.011
• 皮肤粘膜组织构建 skin and mucosal tissue construction • 上一篇 下一篇
郭晓瑞1,梁 杰2,黄如林3,卢 玲2,金玉丹1,罗少军2,吴志远2
Guo Xiao-rui1, Liang Jie2, Huang Ru-lin3, Lu Ling2, Jin Yu-dan1, Luo Shao-jun2, Wu Zhi-yuan2
摘要:
背景:瘢痕疙瘩的形成受多种基因、细胞因子的调控,然而目前对这些基因、细胞因子的调控表达机制的研究尚不明确。 目的:通过检测人正常皮肤组织和人瘢痕疙瘩组织中microRNAs的表达情况,初步筛选人瘢痕疙瘩microRNAs表达谱。 方法:根据瘢痕疙瘩临床诊断标准及实验要求制定瘢痕疙瘩、正常皮肤病例纳入标准和排除标准,收集瘢痕疙瘩标本(6例)和正常皮肤标本(5例);TRIZOL法提取标本的总RNAs并进行质检,再采用Ambion′s miRNA Isolation Kit从总RNAs中分离microRNAs;荧光标记后与微阵列芯片杂交,扫描检测后数据经SAM和Cluster分析处理,筛选瘢痕疙瘩组织中microRNA差异表达谱。采用实时荧光定量RT-PCR技术验证在瘢痕疙瘩组织中均存在显著差异表达的microRNAs。 结果与结论:通过microRNA微阵列芯片筛选得到人瘢痕疙microRNAs差异表达谱(筛选出显著差异表达microRNAs 12个),与正常皮肤组织比较,microRNAs在瘢痕疙瘩组织中表达下调。提示瘢痕疙瘩microRNAs差异表达可能参与瘢痕疙瘩的发生发展过程,部分microRNAs有可能成为用于瘢痕疙瘩诊治的专有分子标志物。